Livro - Manual de Métodos de Análise Microbiológica de Alimentos e Água 6ª Edição

Autores: Neusely da Silva, Valéria Christina Amstalden Junqueira, Neliane Ferraz de Arruda Silveira, Marta Hiromi Taniwaki, Renato Abeilar Romeiro Gomes, Margarete Midori Okazaki

Editora: Blucher

Resenha
Desde sua primeira edição, em 1997, este livro foi preparado para fornecer um manual de métodos de análise microbiológica de alimentos em português, com metodologia aceita pela Agência Nacional de Vigilância Sanitária (Anvisa).

O principal objetivo do livro é oferecer um manual ilustrado de técnicas de laboratório, com uma visão geral dos métodos disponíveis atualmente. O texto foi preparado para atender tanto a profissionais com formação acadêmica quanto a técnicos de laboratório e estudantes sem formação de nível superior. A configuração didática e a visualização dos procedimentos em esquemas passo a passo permitem entender e executar rapidamente o procedimento pretendido. Cada capítulo fornece vários métodos para determinado exame e alternativas simples ou rápidas disponíveis.

Informações Técnicas

ISBN-10 ‏: ‎ 6555062975

ISBN-13 ‏: ‎ 978-6555062977
Edição 6
Ano 2017
No. de páginas 602

*FOTO MERAMENTE ILUSTRATIVA*

Conteúdo

Capítulo 1 Coleta, transporte e estocagem de amostras para análise 1.1. Introdução Lote Amostra de lote e unidade de amostra Planos de amostragem de lotes Unidade analítica 1.2. Material necessário 1.3. Coleta de amostras para análise 1.3.1. (revisado) Seleção e preparação de frascos para coleta de alimentos acondicionados em embalagens não individuais 1.3.2. Procedimentos para a coleta de alimentos acondicionados em embalagens não individuais 1.3.3. Coleta de alimentos envolvidos em casos de doenças de origem alimentar (DTAs) 1.3.4. (revisado) Coleta de amostras de água 1.4. Transporte e estocagem de amostras até o momento da análise 1.4.1. Transporte e estocagem de alimentos com baixa atividade de água 1.4.2. Transporte e estocagem de alimentos congelados 1.4.3. (revisado) Transporte e estocagem de alimentos refrigerados 1.4.4. Transporte e estocagem de alimentos comercialmente estéreis em embalagens herméticas 1.4.5. (revisado) Transporte e estocagem de amostras de água 1.5. Recepção de amostras para análise 1.6. Referências Capítulo 2 Preparação de amostras para análise 2.1. Introdução 2.2. Material necessário 2.3. Homogeneização da amostra e retirada da unidade analítica 2.3.1. Procedimento para a homogeneização e retirada da unidade analítica de produtos líquidos 2.3.2. Procedimento para a homogeneização e retirada da unidade analítica de produtos sólidos ou líquidos concentrados 2.3.3. Procedimento para a retirada da unidade analítica pela técnica do esfregaço de superfície 2.3.3.1. (revisado) Amostragem com “swabs” 2.3.3.2. Amostragem com esponjas 2.3.4. Procedimento para a retirada da unidade analítica pela técnica da lavagem superficial 2.3.4.1. Procedimento para a lavagem de carcaças de aves 2.3.4.2. Procedimento para a lavagem de outros alimentos 2.3.4.3. Procedimento para a lavagem de embalagens 2.3.5. Guarda de contra-amostras 2.4. (revisado) Preparo da 1ª diluição da unidade analítica Diluentes para os ensaios de presença/ausência Diluentes para os ensaios que requeiram tratamento diferenciado da amostra Diluentes para os ensaios gerais de quantificação Como obter uma diluição inicial de 1:10 (10-1) Como obter uma diluição inicial diferente de 1:10 Procedimento para o preparo da primeira diluição de amostras líquidas Procedimento para o preparo da primeira diluição de amostras sólidas ou líquidos concentrados Procedimento para o preparo da primeira diluição de amostras obtidas por esfregaço de superfície ou por lavagem superficial 2.5. (revisado) Diluição decimal seriada da amostra Como obter a segunda diluição (10-2) Como obter as diluições subsequentes 2.6. Referências Anexo 2.1. (revisado) Procedimentos para homogeneização do conteúdo e retirada da unidade analítica de amostra de diferentes tipos de alimentos a) Produtos em pó b) Produtos pastosos ou moídos c) Iogurtes com pedaços de frutas d) Queijos e) Produtos muito duros f) Peças de alimentos sólidos g) Ovos em casca h) Cortes de carne para análise de contaminação não superficial i) Moluscos bivalves (ostra, mexilhão, lingueirão, berbigão, conquilha, ameijoa) j) Moluscos gastrópodes (caracol, caramujo, búzio, lapa, apa, lesma) k) Moluscos cefalópodes (polvo, lula) l) Caranguejos e lagostas m) Ouriços do mar Anexo 2.2. (revisado) Casos especiais em que há variações na unidade analítica e/ou diluição e/ou diluentes recomendados para a preparação da primeira diluição de amostras de diferentes tipos de alimentos a) Líquidos com baixa contaminação b) Alimentos gordurosos c) Pós de baixa solubilidade com tendência à formação de grumos d) Espessantes ou produtos com antimicrobianos naturais e) Gelatina f) Produtos ácidos g) Farinhas, cereais, ração animal h) Cacau e chocolate i) Clara de ovo líquida j) Produtos fermentados contendo microrganismos vivos destinados à quantificação da microbiota contaminante (exceto probióticos) k) Produtos lácteos em pó (leite, soro de leite, creme de leite, lactose) l) Manteiga m) Produtos lácteos congelados n) Queijos o) Produtos lácteos fermentados p) Caseína e caseinatos q) Paracaseína com problemas de solubilidade r) Moluscos (bivalves e gastrópodes) e ouriços do mar s) Pepinos do mar (Holothuroidea) e tunicados ou ascídias (Ascidiacea) Capítulo 3 Técnicas básicas de contagem de microrganismos em placas 3.1. Introdução 3.2. Plaqueamento em profundidade (pour plate) 3.2.1. Material requerido nas análises 3.2.2. Procedimento 3.3. Plaqueamento em superfície (spread plate) 3.3.1. Material requerido nas análises 3.3.2. (revisado) Procedimento 3.4. Plaqueamento em gotas (drop plate) 3.4.1. Material requerido nas análises 3.4.2. Procedimento 3.5. Filtração em membrana 3.5.1. Material requerido nas análises 3.5.2. Procedimento 3.6. Contagem das colônias e cálculo dos resultados segundo a APHA 3.6.1. Plaqueamento em profundidade 3.6.1.1. Cálculo dos resultados na situação padrão 3.6.1.2. (revisado) Regras para o cálculo em situações não usuais 3.6.1.3. Cálculo dos resultados para amostras preparadas pela técnica do esfregaço de superfície (“swabs” ou esponjas) 3.6.1.4. Cálculo dos resultados para amostras preparadas pela técnica da lavagem superficial 3.6.2. Plaqueamento em superfície 3.6.3. Plaqueamento em gotas 3.6.4. Filtração em membrana 3.7. (revisado) Contagem das colônias e cálculo dos resultados segundo a ISO 3.7.1. Exigências gerais para o cálculo dos resultados 3.7.2. Regras gerais para o cálculo dos resultados 3.7.3. Regras para o cálculo em situações não usuais 3.8. Referências Anexo 3.1. (novo) Limite de concordância aceitável entre as contagens de colônias obtidas em placas de duas diluições subsequentes (ISO 14461-2:2005) Anexo 3.2. (novo) Limite de concordância aceitável entre as contagens de colônias obtidas em um par de placas de uma duplicata (ISO 14461-2:2005) Capítulo 4 Técnicas básicas de contagem de microrganismos pelo número mais provável (NMP) 4.1. Introdução 4.2. Teste de diluição múltipla 4.2.1. Material requerido nas análises 4.2.2. Procedimento 4.3. Teste de diluição única 4.3.1. Material requerido nas análises 4.3.2. Procedimento 4.4. Cálculo dos resultados 4.4.1. Cálculo dos resultados do teste de diluição múltipla 4.4.1.1. Cálculo usando as tabelas de NMP (para diluições decimais) 4.4.1.2. Cálculo usando a fórmula de Thomas (para diluições não decimais) 4.4.1.3. Cálculo dos resultados para amostras preparadas pela técnica do esfregaço de superfície ou da lavagem superficial 4.4.2. Cálculo dos resultados do teste de diluição única 4.5. Referências Anexo 4.1. Tabelas de NMP Capítulo 5 Técnicas básicas de detecção da presença/ausência de microrganismos 5.1. Introdução Enriquecimento Isolamento em meios sólidos (plaqueamento diferencial) Confirmação Teste de catalase Teste de citrato Testes de descarboxilação de aminoácidos Teste de fenilalanina deaminaseTestes de fermentação de carboidratos Teste de indol Teste de malonato Teste de oxidação/fermentação (O/F) Teste de oxidase Teste de redução do nitrato Teste de urease Teste de vermelho de metila (VM) Teste de Voges-Proskauer (VP) 5.2. Material requerido nas análises 5.3. Procedimento a) Pré-enriquecimento Composição de amostras a seco b) Enriquecimento seletivo Composição úmida de amostras em ensaios com duas etapas de enriquecimento Composição úmida em ensaios com uma única etapa de enriquecimento c) Plaqueamento diferencial c.1) Técnica de inoculação por estrias de esgotamento para obter culturas puras d) Seleção de colônias e repique de culturas para confirmação d.1) Técnica de repique de culturas puras a partir de colônias isoladas em placas e) Testes de confirmação e.1) (corrigido) Coloração de Gram (método de Hucker) e.2) (novo) Teste do KOH para confirmação da coloração de Gram duvidosa (Gregersen, 1978) e.3) Coloração de esporos (método de Schaeffer-Fulton) e.4) (corrigido) Coloração de esporos (método de Ashby) e.5) Montagens úmidas par a observação microscópica a fresco 5.4. Referências Capítulo 6 Contagem total de microrganismos aeróbios mesófilos e psicrotróficos em placas 6.1. Introdução 6.1.1. (revisado) Significado da contagem total de aeróbios mesófilos 6.1.2. (revisado) Definição de psicrotróficos 6.1.3. (revisado) Comentários sobre os métodos de análise 6.2. (revisado) Método de plaqueamento APHA 08:2015 para contagem total de aeróbios mesófilos em alimentos 6.2.1. Material requerido para a análise 6.2.2. Procedimento 6.2.2.1. Plaqueamento em profundidade 6.2.2.2. Plaqueamento em superfície 6.2.2.3. Filtração em membrana 6.3. (revisado) Métodos de plaqueamento em Petrifilm™ AOAC 986.33/989.10/990.12 para contagem total de aeróbios mesófilos em alimentos 6.3.1. Material requerido para a análise 6.3.2. Procedimento 6.4. (revisado) Método de plaqueamento APHA 13.61:2015 para contagem de bactérias aeróbias psicrotróficas em alimentos 6.4.1. Material requerido para a análise 6.4.2. Procedimento 6.5. (novo) Métodos de plaqueamento ISO 4833-1:2013 e ISO 4833-2:2013/Corr.1:2014 para contagem total de aeróbios mesófilos em alimentos 6.5.1. Material requerido para a análise 6.5.2. Procedimento 6.6. (novo) Métodos de plaqueamento ISO 6222:1999 para contagem total de aeróbios mesófilos em água 6.6.1. Material requerido para a análise 6.6.2. Procedimento 6.7. Referências Capítulo 7 Contagem de bolores e leveduras 7.1. Introdução 7.1.1. (revisado) Comentários sobre os métodos de análise de bolores e leveduras totais 7.1.2. Fungos psicrotróficos 7.1.3. (revisado) Bolores termorresistentes 7.1.4. Leveduras resistentes a conservantes Zigosaccharomyces bailii Zygosaccharomyces bisporus Schizosaccharomyces pombe Candida krusei Pichia membranaefaciens 7.1.5. Leveduras osmofílicas Zygosaccharomyces rouxii 7.2.a. (revisado) Método de plaqueamento APHA 21:2015 para contagem de bolores e leveduras em alimentos 7.2.a.1. Material requerido para a análise 7.2.a.2. Procedimento 7.2.b. (novo) Métodos de plaqueamento ISO 21527-1:2008 e ISO 21527-2:2008 para contagem de bolores e leveduras em alimentos 7.2.b.1. Material requerido para a análise 7.2.b.2. Procedimento 7.3. (revisado) Método de plaqueamento APHA 13:2015 para contagem de fungos psicrotróficos em alimentos 7.4. (revisado) Método de plaqueamento APHA 22.4:2015 para contagem de bolores termorresistentes em alimentos 7.4.1. Material requerido para a análise 7.4.2. Procedimento 7.5. Métodos de Pitt & Hocking:2009 para plaqueamento ou presença/ausência de leveduras resistentes aos conservantes em alimentos 7.5.1. Material requerido para a análise 7.5.2. Procedimento 7.5.2.1. Método qualitativo de detecção com enriquecimento 7.5.2.2. Método de contagem direta em placas 7.6. (revisado) Método de plaqueamento ou filtração em membrana APHA 17.3:2015 para contagem de leveduras osmofílicas em alimentos 7.6.1. Material requerido para a análise 7.6.2. Procedimento 7.6.2.1. Método de filtração em membrana 7.6.2.2. Método de plaqueamento em profundidade 7.7. Referências Capítulo 8 Contagem de enterobactérias 8.1. Introdução 8.1.1. Taxonomia 8.1.2. Comentários sobre os métodos de análise 8.2. (revisado) Método de plaqueamento APHA 9.62:2015 para contagem de enterobactérias em alimentos 8.2.1. Material requerido para a análise 8.2.2. Procedimento 8.3. (revisado) Método do NMP APHA 9.61:2015 para contagem de enterobactérias em alimentos 8.3.1. Material requerido para a análise 8.3.2. Procedimento 8.4. (revisado) Método do Petrifilm™ AOAC 2003.1:2016 para contagem de enterobactérias em alimentos 8.4.1. Material requerido para a análise 8.4.2. Procedimento 8.5. (novo) Método de plaqueamento ISO 21528-2:2004 para contagem de enterobactérias em alimentos 8.5.1. Material requerido para a análise 8.5.2. Procedimento8.6. Referências Capítulo 9 Contagem de coliformes totais, coliformes termotolerantes e Escherichia coli 9.1. Introdução 9.1.1. Definição de coliformes totais 9.1.2. Definição de coliformes termotolerantes 9.1.3. E. coli 9.1.4. Aplicação como indicadores 9.1.5. (revisado) Comentários sobre os métodos de análise 9.2. (revisado) Métodos do NMP APHA 9:2015 e APHA/AWWA/WEF 9221:2012 para contagem de coliformes totais/coliformes termotolerantes/E. coli em água e alimentos 9.2.1. Material requerido para a análise 9.2.2. Procedimento 9.3. (revisado) Método de plaqueamento APHA:2015 para contagem de coliformes totais em alimentos 9.3.1. Material requerido para a análise 9.3.2. Procedimento 9.4. (revisado) Método do NMP AOAC 992.30 (ColiComplete™) para contagem de coliformes totais e E. coli em alimentos 9.4.1. Material requerido para a análise 9.4.2. Procedimento 9.5 (revisado) Método do Petrifilm™ (AOAC) para contagem de coliformes totais e E. coli em alimentos 9.5.1. Material requerido para a análise 9.5.2. Procedimento 9.6. Método do NMP ISO 7251:2005 para contagem de coliformes termotolerantes e E. coli presuntiva em alimentos 9.6.1. Material requerido para a análise 9.6.2. Procedimento 9.7. (revisado) Método do NMP AOAC 991.15:2016 (substrato cromogênico Colilert®) para contagem de coliformes totais e E. coli em água 9.7.1. Material requerido para a análise 9.7.2. Procedimento 9.8 (novo) Método de filtração ISO 9308-1:2014 para contagem de coliformes totais e E. coli em água 9.8.1. Material requerido para a análise 9.8.2. Procedimento 9.9. Referências Capítulo 10 Staphylococcus aureus 10.1. Introdução 10.1.1 Taxonomia 10.1.1.1. (revisado) O gênero Staphylococcus 10.1.1.2. (revisado) Os estafilococos coagulase positivos 10.1.1.3. Os estafilococos produtores de enterotoxinas 10.1.1.4. Staphylococcus aureus 10.1.2. Epidemiologia 10.1.2.1. As enterotoxinas de S. aureus (SEs) 10.1.2.2. A doença de origem alimentar 10.1.3. Comentários sobre os métodos de análise 10.2. (revisado) Método de plaqueamento APHA 39.63:2015 para contagem de Staphylococcus aureus em alimentos 10.2.1. Material requerido para a análise 10.2.2. Procedimento 10.3. (revisado) Método do NMP APHA 39.62:2015 para Staphylococcus aureus em alimentos 10.3.1. Material requerido para a análise 10.3.2. Procedimento 10.4. (revisado) Método de presença/ausência APHA 39.61:2015 para Staphylococcus aureus em alimentos 10.4.1. Material requerido para a análise 10.4.2. Procedimento 10.5. (novo) Método de plaqueamento ISO 6888-1:1999/Amd 1:2003 para contagem de estafilococos coagulase positivos em alimentos 10.5.1. Material requerido para a análise 10.5.2. Procedimento 10.6. (novo) Método do NMP APHA/AWWA/WEF:2012 para Staphylococcus aureus em água 10.6.1. Material requerido para a análise 10.6.2. Procedimento 10.7. Referências Capítulo 11 Bacillus cereus 11.1. Introdução 11.1.1. (revisado) Taxonomia 11.1.1.1. O grupo Bacillus cereus Bacillus anthracis Bacillus thuringiensis Bacillus mycoides Bacillus pseudomycoides Bacillus weihenstephanensis Bacillus cytotoxicus 11.1.1.2. A espécie Bacillus cereus 11.1.2. (revisado) Epidemiologia 11.1.3. Comentários sobre os métodos de análise 11.2. (revisado) Método de plaqueamento APHA 31.61:2015 para contagem de Bacillus cereus em alimentos 11.2.1. Material requerido para a análise 11.2.2. Procedimento 11.3. (revisado) Método do NMP APHA 31.62:2015 para contagem de Bacillus cereus em alimentos 11.3.1. Material requerido para a análise 11.3.2. Procedimento 11.4. (novo) Método de plaqueamento ISO 7932:2004 para contagem presuntiva de Bacillus cereus em alimentos 11.4.1. Material requerido para a análise 11.4.2. Procedimento 11.5. Referências Capítulo 12 Clostrídios sulfito redutores e Clostridium perfringens 12.1. Introdução 12.1.1. (revisado) Taxonomia Clostridium perfringens Clostrídios sulfito redutores a 46 ºC 12.1.2. (revisado) Epidemiologia 12.1.3. (revisado) Comentários sobre os métodos de análise 12.2. (revisado) Método de plaqueamento APHA 33.72:2015 para contagem de clostrídios sulfito redutores e Clostridium perfringens em alimentos 12.2.1. Material requerido para a análise 12.2.2. Procedimento 12.3. (revisado) Método de presença/ausência APHA 33.71:2015 para Clostridium perfringens em alimentos 12.3.1. Material requerido para a análise 12.3.2. Procedimento 12.4. Método do NMP ISO 6461-1:1986 para esporos de clostrídios sulfito redutores em água 12.4.1. Material requerido para a análise 12.4.2. Procedimento 12.5. (novo) Método de filtração em membrana ISO 14189:2013 para contagem de Clostridium perfringens em água 12.5.1. Material requerido para a análise 12.5.2. Procedimento12.6. (novo) Método de plaqueamento ISO 7937:2004 para contagem de Clostridium perfringens em alimentos 12.6.1. Material requerido para a análise 12.6.2. Procedimento 12.7. (novo) Método de filtração ISO 6461-2:1986 para contagem de esporos de clostrídios sulfito redutores em água 12.7.1. Material requerido para a análise 12.7.2. Procedimento 12.8. Referências Capítulo 13 Contagem de enterococos 13.1. Introdução 13.1.1. (revisado) Taxonomia 13.1.1.1. Streptococcus fecais 13.1.1.2. Enterococcus 13.1.1.3. Diferenciação entre Enterococcus e Streptococcus fecais 13.1.2. (revisado) Comentários sobre os métodos de análise 13.2. (revisado) Método de plaqueamento APHA 10.5:2015 para contagem de enterococos em alimentos 13.2.1. Material requerido para a análise 13.2.2. Procedimento 13.3. (revisado) Método do NMP APHA 10.2:2015 para contagem de enterococos em alimentos 13.3.1. Material requerido para a análise 13.3.2. Procedimento 13.4. (revisado) Método de filtração em membrana APHA/AWWA/WEF 9230C.3c:2012 para contagem de enterococos em água 13.4.1. Material requerido para a análise 13.4.2. Procedimento 13.5. (novo) Método de filtração em membrana ISO 7899-2:2000 para contagem de enterococos em água 13.5.1. Material requerido para a análise 13.5.2. Procedimento 13.6. Referências Capítulo 14. Contagem de bactérias lácticas 14.1. (revisado) Introdução Carnobacterium Enterococcus Fructobacillus Lactobacillus Lactococcus Leuconostoc Oenococcus Pediococcus Streptococcus Tetragenococcus Vagococcus Weissella Comentários sobre os métodos de análise 14.2. (revisado) Métodos de plaqueamento APHA 19.52:2015 para contagem de bactérias lácticas em alimentos 14.2.1. Material requerido para a análise 14.2.2. Procedimento 14.3. (revisado) Métodos de NMP APHA 19.526:2015 e APHA 19.524:2015 para contagem de bactérias lácticas em alimentos 14.3.1. Material requerido para a análise 14.3.2. Procedimento APHA 19.526:2015 utilizando o Caldo MRS 14.3.3. Procedimento APHA 19.524:2015 utilizando o Caldo Rogosa SL 14.4. (novo) Método de plaqueamento ISO 15214:1998 para contagem de bactérias lácticas em alimentos 14.4.1. Material requerido para a análise 14.4.2. Procedimento 14.5. Referências Capítulo 15 Campylobacter 15.1. Introdução 15.1.1. (revisado) Taxonomia 15.1.1.1. Campylobacter 15.1.1.2. Campylobacter termotolerantes 15.1.2. (revisado) Epidemiologia 15.1.3. (revisado) Comentários sobre os métodos de análise 15.2. Método presença/ausência ISO 10272-1:2006 15.2.1. Material requerido para a análise 15.2.2. Procedimento 15.3. Referências Capítulo 16 Cronobacter 16.1. Introdução 16.1.1. Taxonomia Cronobacter Iversen et al. 2008, gen. nov. Características nutricionais e de crescimento 16.1.2. (revisado) Epidemiologia 16.1.3. (revisado) Ecologia 16.1.4. Métodos de análise 16.2. Método de presença/ausência ISO 22964:2006 16.2.1. Material requerido para a análise 16.2.2. Procedimento 16.3. Referências Capítulo 17 Escherichia coli O157:H7 17.1. (revisado) Introdução 17.1.1. Taxonomia 17.1.2. Epidemiologia 17.1.3. Comentários sobre os métodos de análise 17.2. (revisado) Método BAM/FDA:2016 para presença/ausência de E. coli O157:H7 em alimentos 17.2.1. Material requerido para a análise 17.2.2. Procedimento 17.3. Referências Capítulo 18 Listeria monocytogenes 18.1. (revisado) Introdução 18.1.1. Taxonomia 18.1.2. Epidemiologia 18.1.3. Comentários sobre os métodos de análise 18.1.3.1 Os métodos de detecção (presença/ausência) 18.1.3.2. Os métodos de contagem 18.1.3.3. Os “kits” analíticos 18.1.3.4. Cuidados especiais na realização das análises 18.2. (revisado) Método FDA/BAM.10:2016 para detecção ou contagem de Listeria monocytogenes em alimentos 18.2.1. Material requerido para a análise 18.2.2. Procedimento 18.3. (revisado) Método USDA/MLG 8.10:2017 para detecção ou contagem (NMP) de Listeria monocytogenes em carnes/aves/ovos 18.3.1. Material requerido para a análise 18.3.2. Procedimento 18.4. (corrigido) Método de plaqueamento ISO 11290-2:1998/Amendment 1:2004 para contagem de L. monocytogenes em alimentos 18.4.1. Material requerido para a análise 18.4.2. Procedimento 18.5. Método ISO 11290-1:1996/Amendment 1:2004 para presença ou ausência de L. monocytogenes em alimentos 18.5.1. Material requerido para a análise 18.5.2. Procedimento 18.6. Referências Capítulo 19 Salmonella 19.1. Introdução 19.1.1. (revisado) Classificação taxonômica de Salmonella 19.1.2. Classificação sorológica de Salmonella Os antígenos somáticos Os antígenos capsulares Os antígenos flagelares “H” O esquema de White-Kauffmann-Le Minor A nomenclatura dos sorotipos Os sorotipos mais comuns 19.1.3. Características bioquímicas de Salmonella 19.1.4. (revisado) Epidemiologia 19.1.5. Comentários sobre os métodos tradicionais de análise de Salmonella 19.1.6. Comentários sobre os métodos alternativos de análise de Salmonella 19.1.7. Composição de amostras para a análise Composição a seco Composição úmida 19.2. (corrigido) Método ISO 6579 para presença/ausência de Salmonella em alimentos 19.2.1. Material requerido para a análise 19.2.2. Procedimento 19.3. (revisado) Método BAM/FDA:2016 para presença/ausência de Salmonella em alimentos 19.3.1. Material requerido para a análise 19.3.2. Procedimento 19.4. (revisado) Método MLG/FSIS/USDA:2017 para presença/ausência ou NMP de Salmonella em alimentos 19.4.1. Material requerido para a análise 19.4.2. Procedimento 19.5. Referências Capítulo 20 Vibrios patogênicos 20.1. Introdução 20.1.1. Taxonomia 20.1.2. (revisado) Epidemiologia 20.1.2.1. V. cholerae 20.1.2.2. V. parahaemolyticus 20.1.2.3. V. vulnificus 20.1.3. (revisado) Comentários sobre os métodos de análise 20.2. (revisado) Método APHA 40.61:2015 para presença/ausência ou NMP de Vibrio cholerae em alimentos e água 20.2.1. Material requerido para a análise 20.2.2. Procedimento 20.3. (revisado) Métodos APHA 40.62/40.63:2015 para presença/ausência ou NMP de V. parahaemolyticus e V. vulnificus 20.3.1. Material requerido para a análise 20.3.2. Procedimento 20.4. Referências Capítulo 21 Yersinia enterocolitica 21.1. Introdução 21.1.1. (revisado) Taxonomia 21.1.2. (revisado) Epidemiologia 21.1.3. Comentários sobre os métodos de análise 21.2. (revisado) Método APHA 41:2015 para presença/ausência de Yersinia enterocolitica em alimentos 21.2.1 Material requerido para a análise 21.2.2. Procedimento 21.3. (novo) Método ISO 10273:2003 para presença/ausência de Yersinia enterocolitica patogênica presuntiva em alimentos 21.3.1 Material requerido para a análise 21.3.2. Procedimento 21.4. Referências Capítulo 22 Contagem de esporos de bactérias 22.1. Introdução 22.1.1. (novo) O esporo bacteriano Sequência de formação do esporo Estrutura do esporo Mecanismos de resistência do esporo Germinação Resistência térmica 22.1.2. (revisado) Taxonomia das bactérias esporogênicas importantes em alimentos Aeribacillus Alicyclobacillus Alicyclobacillus acidiphilus Alicyclobacillus acidoterrestris Alicyclobacillus acidocaldarius Alicyclobacillus contaminans Alicyclobacillus dauci Alicyclobacillus fastidiosus Alicyclobacillus herbarius Alicyclobacillus pomorum Alicyclobacillus sacchari Aneurinibacillus Aneurinibacillus thermoaerophilus Anoxybacillus Anoxybacillus contaminans Anoxybacillus tepidamans Bacillus Bacillus coagulans Bacillus smithii Bacillus sporothermodurans Brevibacillus Clostridium Clostridium botulinum Clostrídios proteolíticos Clostrídios sacarolíticos Clostrídios psicrófilos ou psicrotróficos deteriorantes de carnes embaladas à vácuo refrigeradas Cohnella Desulfotomaculum Desulfotomaculum nigrificans Geobacillus Geobacillus stearothermophilus Lysinibacillus Moorella Paenibacillus Sporolactobacillus Thermoanaerobacter Thermoanaerobacterium T. thermosaccharolyticum Virgibacillus 22.2. (revisado) Métodos APHA 25:2015 e APHA 26:2015 para contagem de esporos de termófilos aeróbios totais e “flat-sour” 22.2.1. Material requerido para a análise 22.2.2. Procedimento para a análise de açúcar 22.2.3. Procedimento para a análise de amido 22.2.4. Procedimento para a análise de tomates inteiros, polpa de tomate, purê de tomate e leite concentrado 22.2.5. Procedimento para a análise de leite em pó desnatado 22.2.6. Procedimento para a análise de creme de leite 22.2.7 Procedimento para a análise de outros alimentos (geral) 22.3. (revisado) Métodos APHA 27:2015 para detecção de esporos de termófilos anaeróbios não produtores de H2S (Thermoanaerobacterium thermosaccharolyticum) 22.3.1. Material requerido para a análise 22.3.2. Procedimento para a análise de açúcar e leite em pó 22.3.3. Procedimento para a análise de amido e farinhas 22.3.4. Procedimento para a análise de cereais e massas alimentícias 22.3.5. Procedimento para a análise de cogumelos frescos 22.3.6. Procedimento para a análise de produtos na linha de processamento 22.4. (revisado) Métodos APHA 28:2015 para contagem de esporos de termófilos anaeróbios produtores de H2S (Desulfotomaculum nigrificans) 22.4.1. Material requerido para a análise 22.4.2. Procedimento para a análise de açúcar 22.4.3. Procedimento para a análise de amido e farinhas 22.4.4. Procedimento para a análise de leite em pó desnatado 22.4.5. Procedimento para a análise de isolados proteicos de soja 22.5. (revisado) Métodos APHA 23:2015 para contagem de esporos de mesófilos aeróbios 22.5.1. Material requerido para a análise 22.5.2. Procedimento para alimentos em geral 22.5.3. Procedimento para a análise de leite e produtos lácteos 22.5.4. Procedimento para a análise de água 22.6. (revisado) Método APHA 24:2015 para contagem de esporos de mesófilos anaeróbios22.6.1. Material requerido para a análise 22.6.2. Procedimento para a análise de açúcar 22.6.3. Procedimento para a análise de amido, farinhas e outros produtos de cereais 22.6.4. Procedimento para a análise de vegetais desidratados 22.6.5. Procedimento para a análise de condimentos 22.6.6. Procedimento para a análise de ovo em pó, leite em pó e outros produtos lácteos em pó 22.6.7. Procedimento para a análise de leite fluido e queijos 22.6.8. Outros procedimentos 22.7. Método IFU 12:2007 para detecção e contagem de Alicyclobacillus 22.7.1. Material requerido para a análise 22.7.2. Procedimento para a análise de matéria-prima 22.7.3. Procedimento para a análise de produto final 22.7.4. Interpretação e cálculo dos resultados 22.8. Referências Capítulo 23 Esterilidade comercial ou causa da deterioração 23.1. Introdução Definição de esterilidade comercial Classificação dos alimentos comercialmente estéreis Alimentos de baixa acidez Alimentos ácidos 23.1.1. Parâmetros de avaliação da resistência térmica dos microrganismos Curva de sobrevivência e tempo de redução decimal (valor D) Número de reduções decimais Curva de destruição térmica e coeficiente de temperatura (valor z) 23.1.2. (atualizado) Valores D e z de microrganismos de importância em alimentos Células vegetativas Esporos de bolores termorresistentes Esporos de bactérias Bactérias esporogênicas aeróbias termófilas estritas Bactérias esporogênicas anaeróbias termófilas estritas Bactérias esporogênicas aeróbias termófilas facultativas Bactérias esporogênicas aeróbias mesófilas Bactérias esporogênicas mesófilas anaeróbias 23.1.3. Dimensionamento de processos térmicos Definição da intensidade do processo térmico 23.1.4. Deterioração microbiana de alimentos enlatados Subprocessamento Contaminação pós-processamento (vazamento) Deterioração por termófilos estritos Multiplicação microbiana antes do tratamento térmico Causas não microbianas de deterioração 23.2. (revisado) Método APHA:2015 para teste de esterilidade comercial e determinação da causa da deterioração de alimentos de baixa acidez 23.2.1. Material requerido para a análise 23.2.2. Procedimento 23.2.3. Interpretação dos resultados 23.3. (revisado) Método APHA:2015 para teste de esterilidade comercial e determinação da causa da deterioração de alimentos ácidos 23.3.1. Material requerido para a análise 23.3.2. Procedimento 23.3.3. Interpretação dos resultados 23.4. Referências Capitulo 24 Pseudomonas spp 24.1. Introdução Pseudomonas Pseudomonas em água tratada para consumo humano Pseudomonas em água mineral e água natural Pseudomonas em alimentos ShewanellaShewanella putrefaciens (sinônimo Pseudomonas putrefaciens) Janthinobacterium Janthinobacterium lividum (sinônimo Pseudomonas mephitica) Stenotrophomonas Stenotrophomonas maltophilia (sinônimo Pseudomonas maltophilia) Comentários sobre os métodos de análise 24.2. Método do NMP APHA/AWWA/WEF 9213:2012 para contagem de Pseudomonas aeruginosa em água 24.2.1. Material requerido para a análise 24.2.2. Procedimento 24.3. (novo) Método de filtração em membrana ISO 16266:2006 para contagem de Pseudomonas aeruginosa em água 24.3.1. Material requerido para a análise 24.3.2. Procedimento 24.4. (revisado) Método de plaqueamento ISO 13720:2010 para contagem presuntiva de Pseudomonas spp em carne e produtos cárneos 24.4.1. Material requerido para a análise 24.4.2. Procedimento 24.5. Método de plaqueamento ISO 11059:2009 para contagem de Pseudomonas spp em leite e produtos lácteos 24.5.1. Material requerido para a análise 24.5.2. Procedimento 24.6. Referências Capítulo 25 Preparação de material de laboratório para análises microbiológicas 25.1. (revisado) Descontaminação e descarte de resíduos contaminados 25.2. Lavagem 25.3. Acondicionamento 25.4. (revisado) Esterilização 25.5. Preparo de vidraria nova 25.6. Controle de qualidade do material 25.6.1. (revisado) Verificação da limpeza 25.6.2. (revisado) Verificação da esterilização 25.6.3. Verificação da presença de resíduos tóxicos 25.7. Referências Capítulo 26 Cuidados na preparação de meios de cultura e reagentes para análises microbiológicas 26.1. Introdução 26.1.1. Ingredientes utilizados na formulação de meios de cultura 26.1.1.1. (revisado) Água para o preparo de meios e reagentes 26.1.1.2. Fontes de nutrientes em meios de cultura 26.1.1.3. Agentes seletivos 26.1.1.4. Agentes diferenciais 26.1.1.5. Agentes redutores 26.1.1.6. Agentes tamponantes 26.1.1.7. Substratos cromogênicos e fluorogênicos 26.1.1.8. Ágar 26.1.2. (revisado) Classificação dos meios de cultura 26.1.2.1. Classificação pela composição 26.1.2.2. Classificação pela consistência 26.1.2.3. Classificação pela forma de preparação 26.1.2.4. Classificação pela função 26.2. Procedimento para preparação de meios de cultura26.2.1. Armazenamento dos insumos para preparo de meios de cultura 26.2.2. Pesagem e reidratação 26.2.3. Dissolução e dispersão 26.2.4. Verificação e ajuste do pH antes da esterilização 26.2.5. Distribuição 26.2.6. Esterilização pelo calor úmido 26.2.7. Esterilização por filtração 26.2.8. Verificação depois da esterilização 26.2.9. Preparação dos suplementos para meios de cultura 26.2.10. (revisado) Estocagem dos meios esterilizados até o momento do uso 26.2.10.1. Recomendações da ISO 11133:2014 26.2.10.2. Recomendações do Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater (Hunt, 2012) 26.2.11. Preparação dos meios no momento do uso 26.3. Referências Anexo 1 Preparo de meios e reagentes para as análises Ágar/Caldo Acetamida Ágar/Caldo APT (All Purpose Tween) Ágar APT Acidificado Ágar APT BCP 2% Sacarose Ágar APT 1,5% Glicose Ágar Azul de Toluidina DNA Ágar/Caldo Bacillus acidoterrestris (BAT) Ágar Baird-Parker (BP) Ágar Batata Dextrose Acidificado (PDA-AC) Ágar Batata Dextrose com Antibióticos (PDA-ANT) Ágar Bile Esculina Ágar Bile Esculina Azida Ágar Bismuto Sulfito (BS) Ágar Cefalotina Fusidato Cetrimida (CFC)Ágar Cefsulodina Irgasan Novobiocina (CIN) Ágar Celobiose Colistina (CC)Ágar Celobiose Polimixina Colistina Modificado (m-CPC) Ágar Charcoal Cefoperazona Desoxicolato Modificado (m-CCDA) (também chamado de Ágar Campylobacter Charcoal Diferencial Modificado) Ágar Chromagar Listeria Ágar Chromagar Vibrio Ágar Citrato Azida Ágar Citrato de Simmons Ágar Cloreto de Lítio Feniletanol Moxalactan (LPM) Suplementado com Esculina e Fe3+ Ágar Coliformes Cromogênico (CCA) Ágar Columbia Sangue (CBA) Ágar (Caldo) Dextrose Triptona (DTA/DTB) Ágar Dicloran Glicerol 18 (DG18) Ágar Dicloran Rosa de Bengala Cloranfenicol (DRBC) Ágar (Caldo) Elliker Ágar Entérico de Hecktoen (HE) Ágar Extrato de Levedura (YEA) Ágar (Caldo) Extrato de Levedura Amido Glicose (YSG) Ágar Extrato de Levedura Glicose Cloranfenicol (YEGC) Ágar Extrato de Malte com Antibióticos (MEA ANT) Ágar Extrato de Malte 0,5% Ácido Acético (MAA) Ágar Extrato de Malte Extrato de Levedura 40% Glicose (MY40G) Ágar Fenilalanina Deaminase Ágar Fígado de Vitela (LVA) Ágar Gema de Ovo Anaeróbico (AEY) Ágar Gentamicina Tálio Carbonato Fluorogênico (FGTC) Ágar Glicose Ágar (Caldo) Infusão Cérebro Coração (BHIA/BHI) Ágar de Isolamento de Enterobacter sakazakii (ESIA) Ágar K Ágar KF Streptococcus (KF) Ágar Kim-Goepfert (KG) Ágar Kligler Ferro (KIA) Ágar Leveduras Resistentes aos Conservantes (PRY) (Preservative Resistant Yeasts Medium) Ágar Levine Eosina Azul de Metileno (L-EMB) Ágar Lipovitelenina Sal Manitol (LSM) Ágar Lisina Arginina Ferro (LAIA) Ágar Lisina Ferro (LIA) Ágar Lisina Ferro Duplamente Modificado (DM-LIA) Ágar Listeria Ottaviani & Agosti (ALOA) Ágar MacConkey Ágar MacConkey Sorbitol Telurito Cefixima (TC-SMAC) Ágar Manitol Gema de Ovo Polimixina (MYP) Ágar m-Enterococos (Slanetz & Bartley Medium) Ágar m-HPC Ágar Motilidade para Bacillus cereus Ágar/Caldo MRS (De Man Rogosa & Sharpe) Ágar MRS Acidificado Ágar MRS Acidificado Frutose 1% Ágar MRS Ácido Sórbico 0,1% Ágar MRS Ácido Sórbico Cisteína Ágar MRS Frutose 0,5% Ágar MRS Modificado Ágar Mueller Hinton 5% Sangue Ágar Nitrato Motilidade Ágar/Caldo Nutriente (NA/NB) Ágar Nutriente Azul de Tripano Ágar Nutriente Manganês (ANMn) Ágar NWRI (HPCA) Ágar Oxford (OXA) Ágar Oxford Modificado (MOX) Ágar Oxoid Listeria Cromogênico (OCLA) Ágar Padrão para Contagem (PCA) Standard Methods Agar (SMA) Tryptone Glucose Yeast Extract Agar Ágar Padrão para Contagem (PCA) Suplementado com Amido Solúvel Ágar Padrão para Contagem (PCA) Suplementado com Cloranfenicol Ágar Palcam Ágar Penicilina Pimaricina (PPA) Ágar Pirazinamidase Ágar Pseudomonas CN Ágar R2A Ágar Rainbow O157 Ágar Rapid’L.mono Ágar R&F O157 Ágar/Caldo Rogosa SL Ágar Salmonella Shigella Desoxicolato (SSDC) Ágar Sangue Nº 2 Ágar Sangue de Cavalo em Sobrecamada (HL) Ágar Selo Ágar Selo Tioglicolato Ágar (Caldo) Soro de Laranja (OSA/OSB) Ágar Sulfeto Indol Motilidade (SIM) Ágar Sulfito Ágar Sulfito Ferro Ágar (Caldo) T1N0 - T1N1 - T1N3 Ágar/Caldo Thermoacidurans (TAA/TAB) Ágar Tiossulfato Citrato Bile Sacarose (TCBS) Ágar Tirosina Ágar Tríplice Açúcar Ferro (TSI) Ágar Tripticase de Soja (TSA) Ágar Tripticase de Soja (TSA) com Magnésio e Oxalato Ágar Triptona Glicose Extrato de Carne (TGE) Ágar (Caldo) Triptona Glicose Extrato de Levedura 0,5% Ácido Acético (TGYA – TGYB) Ágar Triptose Sulfito Cicloserina (TSC) Ágar Tween Esterase Ágar Ureia de Christensen Ágar Verde Brilhante (BG) Ágar Verde Brilhante Sulfa (BGS) Ágar Vermelho Violeta Bile (VRB) Ágar Vermelho Violeta Bile com Glicose (VRBG) Ágar Xilose Lisina Desoxicolato (XLD) Ágar Xilose Lisina Tergitol 4 (XLT4) Água Peptonada 0,1% (H2Op) Água Peptonada Alcalina (APA) Água Peptonada Tamponada (BPW) Água Peptonada Tamponada com Cristal Violeta Água Peptonada Tamponada Modificada com Piruvato (mBPWp) Água Salina Peptonada (H2Osp) Água Verde Brilhante (H2Ovb) Álcool 70% Álcool Iodado Álcool Iodado 3:1 Caldo Acetamida = vide Ágar/Caldo Acetamida Caldo Acetamida ISO 16266 Caldo Ácido (CA) = vide Caldo Thermoacidurans (mesma formulação) Caldo Ali Caldo APT = vide Ágar/Caldo All Purpose Tween Caldo Asparagina Caldo Bacillus acidoterrestris (BAT) = vide Ágar/Caldo Bacillus acidoterrestris Caldo Bolton Caldo Brucella Caldo Cianeto de Potássio (KCN) (cuidado, veneno) Caldo Citrato de Koser Caldo Descarboxilase Caldo Descarboxilase de Falkow Caldo Dextrose Púrpura de Bromocresol (BCP) Caldo Dextrose Triptona (DTB) = vide Ágar (Caldo) Dextrose Triptona Caldo Diferencial Reforçado para Clostrídios (DRCM) Caldo E. coli (EC) Caldo E. coli com 4-metilumbeliferil-β-D-glicuronídeo (EC-MUG) Caldo de Enriquecimento de Enterobacteriaceae (EEB) Caldo de Enriquecimento para Listeria Tamponado (BLEB) Caldo de Enriquecimento de Listeria Tamponado com Ácido Morfolinopropanosulfônico (MOPS-BLEB) Caldo Extrato de Levedura Amido Glicose (YSG) = vide Ágar/Caldo Extrato de Levedura Amido Glicose Caldo Extrato de Malte (EM) Caldo Fraser – Half-Fraser – Half-Fraser Base Caldo de Fígado (CF)Caldo Half-Fraser = vide Caldo Fraser – Caldo Half-Fraser – Caldo Fraser Base Caldo Infusão Cérebro Coração (BHI) = vide Ágar/Caldo Infusão Cérebro Coração Caldo Infusão de Vitela (VIB)Caldo Irgasan Ticarcilina Clorato (ITC) Caldo KF Streptococcus (KFB)Caldo Lactosado (CL)Caldo Lactose Sulfito (LS)Caldo Lauril Sulfato Triptose (LST)Caldo Lauril Sulfato Triptose Modificado Vancomicina (m-LST-V)Caldo Malonato Modificado Caldo MRS (De Man, Rogosa & Sharpe) = vide Ágar/Caldo MRS Caldo M-Staphylococcus Caldo Nitrato Caldo Nutriente (NB) = vide Ágar/Caldo Nutriente Caldo Nutriente Lisozima Caldo Peptona Sorbitol Bile (PSBB) Caldo de Pré-Enriquecimento Universal Caldo Púrpura Base Carboidratos Caldo Rappaport-Vassiliadis Modificado (RV = R10) Caldo Rappaport-Vassiliadis Soja (RVS) Caldo Rogosa SL = vide Ágar/Caldo Rogosa SL Caldo Selenito Cistina (SC)Caldo Soro de Laranja (OSB) = vide Ágar/Caldo Soro de Laranja Caldo T1N0 e T1N3 = vide Ágar/Caldo T1N0 - T1N1 - T1N3 Caldo Tetrationato (TT)Caldo Tetrationato Hajna (TTH) Caldo Tetrationato Muller Kauffmann Novobiocina (MKTTn) Caldo Thermoacidurans (TAB) = vide Ágar/Caldo ThermoaciduransCaldo Tripticase de Soja (TSB) Caldo Triptona 1% Caldo Triptona Glicose Extrato de Levedura 0,5% Ácido Acético (TGYB) = vide Ágar/Caldo Triptona Glicose Extrato de Levedura 0,5% Ácido Acético Caldo Universidade de Vermont Modificado (UVM) Caldo Ureia Rápido Caldo Ureia de Rustigian & Stuart Caldo Verde Brilhante Bile 2% (VB) Caldo Vermelho de Fenol-Carboidratos Caldo VM VP Caldo VP Modificado para Bacillus Discos de Indoxil Acetato Escala de McFarland Etanol 70% = vide Álcool 70% Formalina = vide Solução Salina Formalinizada Leite em Pó Desnatado Reconstituído Leite Tornassolado (Litmus Milk) Meio de Carne Cozida (CMM) Meio de Fermentação de Carboidratos para Clostridium perfringens Meio de King B Meio de Lactose Gelatina (MLG) Meio PE-2 Meio Reforçado para Clostrídios (RCM) Meio Reforçado para Clostrídios com Lactato (RCML) Meio Teste de Motilidade Meio Teste de Motilidade ISO Meio de Tioglicolato (TGM) Reagente de Beta-Galactosidase (orto-nitrofenil-β-d-galactopiranosídeo – ONPG) Reagente de Beta-Glicosidase Reagente de Catalase (Peróxido de Hidrogênio 3%) Reagentes para Coloração de Esporos (Ashby) Reagentes para Coloração de Gram (Hucker) Reagente de Fosfatase Ácida Reagente de Kovacs para Teste de Indol (Solução alcoólica 5% p-dimetilaminobenzaldeído) Reagente de Kovacs para Teste de Oxidase (Solução 1% de cloridrato de N,N,N,N-tetrametil-p-fenilenodiamina) Reagente de Nessler Reagentes de Nitrato (Solução 0,8% ácido sulfanílico e solução 0,5% alfa-naftol) Reagente de Nitrato ISO 7937 (Mistura da solução de ácido 5-amino-2-naftalenossulfônico com solução de ácido sulfanílico) Reagente de VM para Teste de Vermelho de Metila Reagentes de VP para Teste de Voges Proskauer (Solução 40% de hidróxido de potássio ou sódio e solução 5% de alfa-naftol) Reagentes de VP ISO para Teste Voges-Proskauer (Solução 1-naftol, solução aquosa 40% hidróxido de potássio, solução de creatina) Soluções de Ácido Clorídrico (HCl) Solução de Azul Brilhante de Coomassie Solução de Azul de Bromotimol 0,04% Solução de Citrato de Sódio 2% Solução de Cloreto Férrico 10% Soluções de Corantes e Indicadores de pH para Adição em Meios de Cultura Solução de Desoxicolato de Sódio 0,5% Solução de Fosfato de Potássio (K2HPO4) 2% Solução de Fosfato de Potássio (K2HPO4) 2% com Antiespumante Solução de Hidróxido de Potássio Salina 0,5% Soluções de Hidróxido de Sódio Solução Hipoclorito de Sódio 100 ou 200 mg/l (100 ou 200ppm) Solução de Hipurato de Sódio Solução Iodo Desinfetante Solução de Ninidrina Solução de Ringer ¼ de Concentração Solução de Safranina 0,5% Solução Salina 0,85% Solução Salina Formalinizada (Formalina) Solução de Sudan Black 0,3% Solução de Sulfato Ferroso Amoniacal 1% Solução Tamponada Glicerol Sal Solução Tiossulfato de Sódio 3% ou 10% Solução de Tripolifosfato 2% Solução de Verde Malaquita (Aquosa 5%) = vide Reagentes para Coloração de Esporos Tampão Fosfato pH 7,2 (PB) (Tampão Butterfield = Água de Diluição Fosfato) Tampão Fosfato Conforme ISO 6887-4:2003 Tampão Fosfato Conforme ISO 6887-5:2010 Tampão Fosfato com Cloreto de Magnésio (PB-MgCl2) Tampão Fosfato Salina (PBS) Tampão Fosfato Salina 0,02M para Teste de Lisostafina Vaspar Referências